Professor Jasper „T“ Thalheim (gespielt von Matthias Matschke) lehrt an der Uni Köln Kriminalistik und Kriminalpsychologie. Er ist eine absolute Koryphäe auf seinem Gebiet und als solche gleichermaßen bewundert und gefürchtet – denn seine direkte Kritik trifft stets mitten ins Schwarze.
Neben seiner Intelligenz und seinen rationalen Analysefähigkeiten ist er mit einer ausgeprägten Ansteckungsphobie ausgestattet. Seine ständigen Begleiter: Blaue Hygienehandschuhe und Desinfektionsspray.
Die gewohnte Situation seines Lehrpodiums ändert sich grundlegend, als seine ehemalige Studentin Anneliese Deckert ihn bittet, die Kripo Köln bei der Ermittlungsarbeit zu unterstützen. Hier trifft er unter anderem auf seine Exfreundin, die Kriminaldirektorin Christina Fehrmann.

Christina Fehrmann (gespielt von Julia Bremermann) ist Kriminaldirektorin der Kripo Köln. Ihre Karriere verlief bisher geradlinig und unspektakulär. Ohne sich zu verbiegen, direkt und empathisch, dazu smart und fachlich immer auf den Punkt, bringt sie eine natürliche Autorität mit, die ihr Respekt und Anerkennung verschafft.
Als plötzlich T wieder in ihr Leben tritt, reagiert sie umso überraschter. Der Mann, mit dem sie in Studententagen eine Beziehung geführt hat, wird nun schlagartig wieder Teil ihres Alltags - wenn auch auf beruflicher Ebene. Was erst Freude bei ihr auslöst, ist nicht von Dauer, denn die Zusammenarbeit mit T wird zu einer emotionalen Zerreißprobe. Als die Dynamik in ihrem Team sich durch T zu verändern droht, muss sie unbequeme Entscheidungen treffen, obgleich Jasper insgeheim immer noch ihr Herz berührt.

Kriminalhauptkommissar Simon Zander (gespielt von Simon Böer) wird in der 3. Staffel neuer Teamleiter der Kölner Kriminalinspektion I. Vorher war er im Drogendezernat tätig und hatte in dieser Funktion schon Kontakt zu den Kollegen. Einerseits wirkt Zander sehr charmant und zielstrebig, würzt seine Reden gerne etwas angeberisch mit lateinischen Begriffen. Auf der anderen Seite hat er etwas Undurchdringliches und scheint Geheimnisse zu verbergen, u.a., dass er heimlich kokst. In Thalheim sieht er einen unliebsamen Konkurrenten, der sich zu sehr in die Arbeit der Polizei einmischt. Zander mag es nicht, wenn man ihm zu sehr auf die Finger schaut. In die Enge getrieben kann er gefährlich werden…

Daniel Winter (gespielt von Andreas Helgi Schmid) ist als charmanter, gewitzter und junger Kommissar der perfekte Schwiegersohn-Traum. An der Seite von Anneliese ermittelt er in Rabes Team. Er hat zwar nicht immer sofort den klaren Durchblick wie seine Kollegin, aber dafür sein Herz am rechten Fleck. Als Partner ergänzen sich die beiden hervorragend. Sobald Anneliese mal wieder aufbrausend mit dem Kopf durch die Wand will, schafft es Daniel, sie mit seiner ruhigen Art etwas abzukühlen. Nachdem beide eines Abends gemeinsam im Bett landen, ist Daniel davon überzeugt, dass sie nicht nur beruflich, sondern auch privat das perfekte Team wären.
Professor T ist für Daniel ein bizarrer, aber interessanter Mensch, dessen Neurosen ihn ab und an zum Schmunzeln bringen. Er ist fasziniert von Ts Ermittlungserfolgen und saugt seine Theorien wissbegierig auf.

Greta Lindbergh (gespielt von Cornelia Ivancan) ist die Neue bei der Kripo Köln. Als Nachfolgerin von Anneliese Deckert wird ihr der Einstieg in das eingeschweißte Team nicht besonders leicht gemacht. Lediglich Daniel lässt seine neue Partnerin langsam an sich ran und bekommt von Greta Unterstützung und Rückendeckung bei seinen Plänen zur Überführung von Annes Mörder.

Die junge Ermittlerin findet so manche Arbeitsschritte und Vorgehensweisen der Kripo Köln fragwürdig. Vor allem kann Greta wirklich nicht verstehen, warum der bizarre Jasper Thalheim den Kommissaren ständig dabei helfen muss, Fälle zu klären und ihre Arbeit zu machen. Professor T. und die gebürtige Bielefelderin brauchen einige Zeit bis sie miteinander warm werden - und dann die Einfälle und Ermittlungen des anderen nahezu wertschätzend zur Kenntnis nehmen.

Anneliese Deckert (gespielt von Lucie Heinze) ist eine Vollblutermittlerin: ehrgeizig, tough und ganz nebenbei bildschön. Von den konservativen Hierarchien des Polizeiapparates hält sie wenig. Die Lösung des Falls steht bei ihr an erster Stelle, dafür nimmt sie auch mal ungewöhnliche Wege auf sich und übergeht Vorgesetzte und Kollegen. So auch als sie T. zum ersten Mal um Unterstützung zur Aufklärung eines für sie sehr persönlichen Falls bittet.
Neben ihrem ausgefüllten Jobleben auf der einen Seite ist ihr Privatleben von der Pflege ihres demenzkranken Vaters geprägt. Für ihn würde Anneliese alles tun. Daher hat sie auch gar keine Zeit, sich ihre Gefühle für den Kollegen Daniel Winter einzugestehen.
Durch ihre Intuition und ihren Ehrgeiz getrieben, kommt sie in der dritten Staffel den Machenschaften eines Kollegen auf die Schliche - eine Erkenntnis, die Anneliese Deckert auf brutale Weise das Leben kostet.

Hauptkommissar Rabe (gespielt von Paul Faßnacht) ist bis zum Ende der Staffel 2 Teamleiter der Kriminalinspektion I. Als Ermittler vom alten Schlag mag er lieber die direkte Konfrontation, als sich in der theoretischen Ursachenforschung zu verlieren. Auf den ersten Blick ein Raubein und Choleriker, sieht man auf den zweiten Blick, dass er ein gebrochener und trauriger Mann ist, der seinen weichen Kern über die Jahre immer weniger zeigen konnte.
Nichtsdestotrotz ist Rabes Team eines der erfolgreichsten. Auf diese Leistung und seine Truppe ist er stolz, deshalb kränkt es ihn umso mehr, als Anneliese mit T einen außenstehenden und dazu noch intellektuellen Berater zu Rate zieht. Polizeiarbeit bedeutet für Rabe Teamarbeit. Ein Einzelgänger wie T hat in seinen Augen nichts bei der Kripo verloren. Allerdings nähern sich die beiden Männer im Verlauf der 2. Staffel an. Am Ende wird Rabe erschossen und stirbt in Thalheims Armen.